تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated Isothermal Amplification

Authors

  • باکویی کتریمی, علی کارشناسی ارشد انگل شناسی دامپزشکی، اداره کل دامپزشکی استان مازندران، ساری، ایران
  • حسینی, سید عبدالله دانشجوی دکتری انگل شناسی پزشکی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • دریانی, احمد استاد، مرکز تحقیقات توکسوپلاسموز، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • سروی, شهاب الدین دانشیار، مرکز تحقیقات توکسوپلاسموز، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • شریف, مهدی استاد، مرکز تحقیقات توکسوپلاسموز، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • عمویی, افسانه دانشجوی دکتری انگل شناسی پزشکی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • میزانی, آزاده دانشجوی دکتری انگل شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات توکسوپلاسموز، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران 2. دانشجوی دکتری انگل شناسی پزشکی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
  • گیل, پوریا دانشیار، گروه فیزیولوژی، فارماکولوژی و نانوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران
Abstract:

Background and purpose: Fasciola hepatica and Fasciola gigantica are common liver flukes which affect both human and livestock worldwide. In this study we evaluated the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for detection and discrimination of Fasciola species. Materials and methods: Fifty adults of Fasciola worms were isolated from sheep and cattle liver form abattoirs in Mazandaran province. A total of 8 primer sets for LAMP was designed to amplify the 28S ribosomal RNA gene of Fasciola sp. Conventional LAMP was carried out in a 20µI reaction mixture under isothermal condition at 60°C for 90 minutes. Amplification result was observed by monitoring the turbidity by naked-eye, using fluorescent dye and gel electrophoresis. The specificity of LAMP method for detecting Fasciola sp. was tested by amplification of Dicrocoelium dendriticum, Trichostrongylus colubriformis, and Echinococcus granulosus DNA templates. To evaluate the detection limit of LAMP assay in detecting Fasciola genus, serial dilution of the extracted DNA was used. Results: A positive LAMP reaction by the specific primers of two species produced many bands of different sizes in 600C after 90 min. The optimal assay conditions were established with no reaction with other parasites’ DNA. The detection limit of this LAMP assay was 1 pg DNA/tube. The result of turbidity and fluorescent dye detection were consistent with agarose gel electrophoresis. Conclusion: Our results demonstrated that LAMP is a rapid, cost-effective, highly specific, easy, and reliable method for differentiation of Fasciola sp. in epidemiological and clinical researches on human and domestic animals in endemic regions of fasciolosis.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated isothermal amplification

سابقه و هدف: فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا فلوک های کبدی شایعی بوده که روی انسان ها و دام ها در تمام نقاط جهان اثرگذار هستند. در مطالعه حاضر ما تکنیک سریع loop-mediated isothermal amplification (lamp) را در تشخیص و افتراق گونه های فاسیولا ارزیابی نمودیم. مواد و روش ها: تعداد 50 کرم فاسیولا از کبد گاو و گوسفند کشتارگاه های استان مازندران جداسازی شدند. تعداد 8 پرایمر جهت تکثیر ناحیه ژنی 28s ...

full text

مقایسه آنتی‌ژن‌های خام فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا به‌وسیله آزمایش الیزا

Background: Fasciolosis is a worldwide disease with major economic and public health consequences. Early detection of the infection is important for the prevention and control of the disease. ELISA allows for early detection of fasciolosis in man and animals. Fasciolosis is caused by Fasciola hepatica and F. gigantica in man and domestic animals respectively. These two species have many similar...

full text

تشخیص بیماریها با استفاده از (Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP در دامپزشکی

 مقدمه و هدف: نیاز به روشی ساده تر، با کارایی بالاتر، سریعتر و ارزانتر نسبت به روشهای موجود جهت تشخیص بیماریهای دامپزشکی روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) ، روشی سریع و حساس می باشد که قادر است تعداد نسخه اندکی از DNA هدف را تا سطحی که توسط ژل الکترفورز قابل تشخیص باشد، تکثیر نماید.بعلت کارایی بالا و قدرت زیاد PCR ، این روش در سالهای اخیر بطور گسترده ای در تشخیص پاتوژن های مختلف بیماریزا اعم ا...

full text

مقایسه فاسیولاهپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا از لحاظ خصوصیات کاریوتیپی

در این مطالعه ابتدا 200 نمونه از انگلهای فاسیولاهپاتیکا و فاسیولاژیگانتیکا از کبد آلوده گوسفندان جدا گردید. پس از شستشو وتهیه سوسپانسیون سلولی،از سلولهای جنسی آنها با روش Air-dry گسترش کروموزومی تهیه شد ، پس از رنگ آمیزی با گمیسا،کروموزومهای دوگونه انگل از لحاظ کاریوتیپی مورد مطالعه و مقایسه قرار گرفت. طبق نتایج به دست آمده اسپرماتوسیتها به صورت روزت هشت تایی و اواوسیت ها به صورت انفرادی مشاهد...

full text

بررسی کارایی روشLAMP (Loop-mediated isothermal DNA amplification)

مقدمه:سالمونلاها از مهمترین باکتری های بیماری و عامل تیفوئید، باکتریمی، آنتروکولیت و سالمونلوز است که از عفونت های مشترک انسان و حیوانات می باشد. بیماریهای ناشی از این عامل یک معضل بزرگ بهداشتی در جهان به خصوص در کشورهای در حال توسعه از جمله کشور ما می باشد. بنابراین تشخیص سریع، دقیق و به موقع آن برای جلوگیری از اپیدمی و عوارض مخرب این باکتری ضروری به نظر می رسد. برای تشخیص سالمونلا روش های مخت...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 26  issue 145

pages  45- 53

publication date 2017-02

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023